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PCR实验室整体解决方案和仪器清单

  • 时间:2020-06-24
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自新型冠状病毒发现以来,武汉市全部疾控中心都处于全面备战状态,除了为武汉防控新型冠状病毒疫情提供信息支持外,更是全面参与一线的防控工作中,特别是PCR实验室新型冠状病毒核酸检测工作。

Pcr实验室又叫基因扩增实验室、DNA实验室,基因检测实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据 。


Pcr实验室应用场所:第三方医学检验所,司法鉴定机构,临床医学检验机构,刑侦技术鉴定机构,农牧业基因检测,食品行业转基因食品检测,食品药品监督所,疾控中心等。

Pcr实验室设备清单:

1、试剂制备区
功能:主要是作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备,试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料需贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。

品类

选型用途

天平

用于精确称量各类试剂

超净工作台

涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

移液器

准确量取特定体积溶液20-100ul

实验室超纯水机

超纯水18.2ΩM.CM

药品冷藏箱

短期保存

试剂低温冰箱

可选2-8°、-20℃

混匀仪

移取样本前需要混匀

消毒车或过氧化氢空间灭菌器

空间环境消毒

灭菌锅或干热灭菌器

实验室物品、试剂、培养基消毒灭菌

PH计

配置试剂是精确测量PH值


2、 样本制备区 
功能:临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时DNA的合成。

品类

选型用途

生物安全柜

为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散

样本低温冰箱

-20℃,-80℃保存样本及DNA

高速台式冷冻离心机

用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物。

有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境。

水浴锅或者金属浴

用于DNA杂交过程中水浴控温

移液器

准确量取特定体积溶液

紫外灯或者过氧化灭菌器

空间环境消毒

混匀仪

移取样本前需要混匀

超净工作台

涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

低温摇床

用于大肠杆菌和酵母菌的振荡培养

磁力搅拌器

加速溶解固体内容物




3、核酸扩增区
功能:主要是DNA扩增,已制备的DNA模板和合成的DNA和主反应混合液,制备成反应混合液等,也可以在本区域内进行。在PCR测定中,通常在扩增后须打开反应管。

品类

选型用途

基因扩增仪

基因检测DNA/RNA扩增

荧光定量PCR仪

核酸定量分析

核酸提取仪/ 分子杂交仪

样品DNA/RNA提取

移液器

准确量取特定体积溶液

紫外灯/过氧化灭菌器

空间环境消毒

超净工作台

涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

纯水装置或实验室超纯水机

用于PCR,DNA测序需要超纯水



4、产物分析区
功能:主要进行的操作为扩增片段的测定,如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。

品类

选型用途

电泳仪

水平电泳用于核酸DNA/RNA检测,垂直电泳用于蛋白检测,转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western检测

凝胶成像系统/紫外检测仪

用于核酸琼脂电泳和蛋白聚丙酰胺的观察和拍照;紫外分析仪用于染色后核酸琼脂电泳胶观察,不能连接电脑,

电炉

电泳琼脂凝胶加热融化