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微生物限度仪放置滤膜步骤
一、滤膜预处理
浸泡活化
取无菌滤膜(孔径通常0.45μm)浸泡于纯化水中3~5分钟,保证滤膜充分润湿。
灭菌准备
使用火焰灭菌器快速灼烧镊子及滤杯支撑网(≥5秒),冷却备用。
二、滤膜安装核心步骤
滤膜定位
用无菌镊子夹取滤膜边缘,光面(疏水层)朝上平铺于滤器底座的支撑网上,确保无褶皱或破损。
密封加固
依次放置PTFE垫圈→滤膜→PTFE垫圈,形成“三明治”结构(部分机型需额外加装橡胶密封圈)。
滤杯固定
将灭菌后的滤杯垂直扣合在底座上,旋紧固定螺母至适度紧固(避免过度挤压导致滤膜变形)。
三、密封性验证与注意事项
漏气检测
连接真空泵后注入10ml纯化水,开启负压(≥50kPa)观察液体流动是否连续均匀,无气泡倒吸。
防污染控制
全程在超净台内操作,镊子每取一片滤膜前需重新灼烧灭菌。
滤膜适配性
强酸/有机溶剂样品选用PTFE滤膜;普通水溶液用纤维素酯膜。
操作禁忌:
滤膜未完全浸湿直接安装→孔径阻塞风险↑
滤膜放置反向(疏水面朝下)→微生物截留率↓
四、故障处理预案
异常现象 解决方案
过滤流速骤降 检查滤膜是否堵塞或未充分润湿
滤膜边缘渗漏 重新安装PTFE垫圈并确认螺母紧固度
负压不稳 检测硅胶管连接密封性(可涂抹凡士林增强气密)
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