一、 微生物限度仪校准：核心维度与操作规范

1.  滤膜过滤系统校准

• 滤膜孔径校准

  选用标准粒子悬浮液（如粒径为 0.45μm 的聚苯乙烯乳胶粒子），通过限度仪过滤后，采用显微镜观察滤膜截留情况。要求滤膜对 0.45μm 标准粒子的截留率≥98%，确保实验中能有效截留目标微生物。

  校准周期：新设备投入使用前必做，后续每 6 个月校准 1 次。

• 过滤流速校准

  量取一定体积的无菌水，设定限度仪额定工作压力，记录过滤完成时间，计算平均流速。流速需与设备说明书标注值偏差≤±10%，避免流速过快导致微生物被冲过滤膜，或流速过慢影响实验效率。

2.  真空系统校准

• 设定设备常用真空度档位（如 - 0.06MPa、-0.08MPa），观察真空计读数与设备显示值的偏差，要求偏差≤±0.005MPa。

• 校准真空系统密封性：关闭设备出口，抽真空至额定值后停止抽气，计时 30 分钟，真空度下降值需≤0.003MPa，防止因漏气导致过滤不彻底。

  校准周期：每月校准 1 次，设备维修后需重新校准。

3.  无菌性验证校准

• 取 3 批空白无菌滤膜，安装至微生物限度仪，分别过滤 100mL 无菌稀释液，随后将滤膜转移至营养琼脂培养基平板，30-35℃培养 48 小时。

• 判定标准：所有空白滤膜的菌落数均为 0，若出现菌落，需排查滤膜灭菌不彻底、设备管路污染、实验环境等问题。

  校准周期：每次实验前做空白验证，每月做 1 次全面无菌性校准。

4.  菌落计数辅助系统校准（全自动机型适用）

• 选用标准菌落板（含已知数量、分布均匀的菌落），放入设备计数模块，记录设备计数结果与标准值的偏差，要求偏差≤±5%。

• 同时校准菌落形态识别能力，确保设备能区分细菌、霉菌、酵母菌菌落，避免误计数。

  校准周期：每季度校准 1 次，更换计数镜头后需重新校准。

二、 微生物限度仪维护：日常保养与故障预防

1.  日常维护（每次实验后）

• 管路与滤杯清洁：拆卸滤杯、导流管，用无菌水冲洗 3 遍，去除残留样品；若处理过含抑菌成分的样品，需用含酶清洗剂浸泡 30 分钟，再用无菌水冲洗至无残留。

• 表面消毒：用 75% 乙醇擦拭设备操作台面、真空接口、控制面板，杀灭表面附着的微生物，防止交叉污染。

• 废液处理：及时清空废液瓶，并用含氯消毒剂浸泡 30 分钟，避免废液滋生细菌反污染设备。

2.  定期维护（每周 / 每月）

• 每周维护：检查真空泵油位，油位需保持在刻度线之间，油液浑浊时及时更换；清洁设备进气口滤芯，防止灰尘堵塞影响真空度。

• 每月维护：拆卸真空管路，用无水乙醇冲洗内部，晾干后重新组装，保持管路通畅；检查滤杯密封圈老化情况，若出现裂纹、变形，立即更换，保证密封性。

• 每季维护：对设备运动部件（如全自动机型的机械臂）添加无菌润滑油，减少磨损；校准设备显示屏亮度与触控灵敏度，确保操作正常。