微生物培养基配制与灭菌实操：避免污染的关键技巧

 无菌操作与储存管理：阻断后续污染途径

1.  倒平板的无菌操作要点

1. 预热与消毒：将灭菌后的固体培养基置于 50℃水浴锅中保温，防止提前凝固；超净工作台紫外消毒 30min 后通风，实验人员穿戴无菌服、口罩、手套，双手用 75% 酒精消毒。

2. 火焰灭菌操作：在酒精灯火焰旁开启锥形瓶棉塞，瓶口快速通过火焰灭菌，防止瓶口杂菌落入。

3. 倒平板规范：每皿倒入 15–20mL 培养基，轻轻晃动培养皿使培养基均匀分布，避免产生气泡；若出现气泡，可用无菌接种环轻轻挑破。

4. 凝固与保存：待培养基完全凝固后，将培养皿倒置存放（防止冷凝水滴落污染培养基表面），标记培养基名称、配制日期，置于 4℃冰箱保存，保存时间不超过 7 天。

2.  培养基储存的注意事项

• 储存条件：固体培养基平板倒置存放于 4℃冰箱，避免阳光直射；液体培养基密封后冷藏，防止挥发和污染。

• 有效期管理：普通培养基冷藏保存不超过 1 周；含抗生素、血清等特殊成分的培养基需现配现用，最长不超过 3 天。

• 污染判定：储存过程中若培养基出现浑浊、异味、菌落或颜色变化，立即丢弃，严禁使用。