如何看待toc测定仪方法用于清洁验证检测

在实施GMP过程中，都遇到一个难题，就是如何进行清洁验证。按GMP要求，企业必须对制药设备的清洁方法进行验证，以确认清洁方法的有效性。但依照目前国内现有的技术水平，很难找到一种合适的验证方法。国外进行清洁验证，比较常用的验证方法主要有HPLC法、uv，Vis分光验证料和清洁剂的理想方法。TOC法的灵敏度可达亿分之一，而且与HPLC法和uv，W8分光光度法相比．具有不需摸索活性成分的检测方法和考虑样品的因素，较为省时等优点。，注射用水和纯化水的标准中采用了TOC法测定有机物含量。将其方法简单修改后可用于清洁验证。

TOC法包括碳的氧化和检测生成的二氧化碳两个过程。现有多种氧化技术，包括光触酶氧化、化学氧化及高温灼烧等。应用TOC法Ⅲ进行清洁验证的方法做一简单介绍，以供参考。在验证中采用的是自行生产的测定仪，配有自动取样toc测定仪器检钡j仪的检测原理是根据直接往水样中滴加磷酸并调节pH至2—3左右。在此pH条件下，样品中的所有无机碳会以C0，的形式释放出来，进入氨气载气中，直接被一个非色散的红外线探测器(帅m)检测此时，假想样品中剩余的碳已全部为有机碳，在紫外照射条件下，向样品中加入过硫酸钠氧化剂，样品中剩余的碳都被氧化成C0，根据NDIR测得的C0，的量可确定水样中的总有机碳量。

对于设备清洁验证，主要有两种TOC取样技术一种是用棉签直接在设备表面擦拭取样，另一种则是用高纯化水最终清洗设备，对清洗液取样进行检测。通常，对设备表面直接取样可显示取样部位的真实清洁程度。本次研究的目的就是通过对不锈钢表面上不同有机残留物的检测来证明1Dc法的有效性及评价测定仪的效能。考核的参数包括线性、检测限、定量限、准确度、精确度以及擦拭回收率。

1 线性

TOE法测定的化合物浓度与测定仪检测数据之间应存在一种线性关系。现选用4种不同清洁剂来考察线性：CIP一1130 (碱性)、CIP一200 (酸性)、Alconox(乳化剂)、Triton—X100 (润湿剂)。结果相关系数范围从0．9787到0．9998。由于易产生泡沫，泡沫会使测定的结果偏低于真实值．同时另取3个活性成分进一步进行线性考查：辅料(蔗糖)、抗生素(万古霉素)和内毒素，结果3种化合物都显示出良好的线性关系，相关系数从0．9996到0．9998。

2 检测限和定量限

采用空白试验法来确定TOE 法检测限(MDL)。试验中的清洗液为低TOC水(<25 X1O|9)，将1O个已清洁小玻璃瓶灌满低TOE水，每个小玻璃瓶内放入一个棉签(切除末端)将溶液涡流振荡，并在检测前放置1h．每个小瓶测4次．将4个检测结果平均，再将1O个空白小瓶的平均测定值平均，然后计算标准偏差。相对于自由度为n～1时，用标准偏差乘以自由度为9、置信限为99％时的f值(3．25，n=lO)确定TOE法的检测限(MDL)，经计算MDL为50X10一，将MDL乘以3可得到定量限为150X 10一。